Lichtausschluss

Danach wird die Lösung zum Syntheseansatz gegeben und unter Lichtausschluss gekuppelt.

The solution is then added to the synthesis approach, coupled with exclusion of light.

Verfahren zur 3D-Strukturaufklärung von Makromolekülen (M), dadurch gekennzeichnet, dass man einen fluoreszenzfähigen Liganden (F) mit einer Fluoreszenzfrequenz im Bereich von (1 bis (2 in das Makromolekül (M) einführt oder dessen räumliche Position zum Makromolekül (M) nach an sich bekannten Verfahren bestimmt, einen oder mehrere photoaktivierbare bifunktionelle Cross-Linker (C) mit einer jeweilligen Anregungsfrequenz im Bereich von (1 bis (2 kovalent zwischen dem nicht-photoaktivierbaren Ende (S) des Cross-Linkers (C, C', C'') und geeigneten funktionellen Gruppen (m) des Makromoleküls (M) unter Lichtausschluss bindet, das Makromolekül (M) oberhalb des Frequenzintervalls (1 bis (2 mit einer Frequenz (Q) bestrahlt, wobei mittels strahlungsloser Übertragung (Förster-Transfer) auf benachbarte Cross-Linker (C und/oder C") das photoaktivierbare Ende (A und/oder A') des Cross-Linkers (C und/oder C") zur Reaktion mit der Oberfläche des Makromoleküls (M) aktiviert und mit der Oberfläche des Makromoleküls (M) in Abhängigkeit des Abstandes des fluoreszenzfähigen Liganden (F) reagiert und die paarweise verknüpften Gruppen durch bioanalytische Verfahren identifiziert, insbesondere spezifischen Verdau des Makromoleküls (M), die Verdaubruchstücke insbesondere nach Masse auftrennt und räumliche Nachbarschaften rechnerisch bestimmt.

The invention also relates to a method for elucidating the 3-D structure of macromolecules (M), characterized in that a ligand (F) capable of fluorescence with a fluorescence frequency in the range (1 to (2 is introduced into the macromolecule (M) or its physical position to the macromolecule (M) is determined using known methods; one or more photoactivatable bifunctional cross-linking agents (C) with a corresponding excitation frequency in the range of (1 to (2) are bound in a covalent manner between the non-photoactivatable end (S) of the cross-linking agents (C, C', C") and suitable functional groups (m) of the macromolecule (M) in the absence of light; the macromolecule (M) is irradiated above the frequency interval (1 to (2 at a frequency (Q, and by means of a radiation-free transfer (Forster transfer) to neighbouring cross-linking agents (C and/or C"), the photoactivatable end (A and/or A') of the cross-linking element (C and/or C") is activated for reaction with the surface of the macromolecule (M) and reacted with the surface of said macromolecule (M) in accordance with the distance of the ligand (F) capable of fluorescence; the groups linked in pairs are identified using bioanalytical methods, especially specific digestion of the macromolecule (M), the digested fragments are divided, especially by mass, and physical proximities are determined by calculation.

Konventionelle Studien zur Sicherheitspharmakologie wurden unter Lichtausschluss an Mäusen, Ratten und Hunden durchgeführt.

Standard safety pharmacology experiments were performed under light protection in the mouse, rat and dog.