Phänotyp

Phänotyp

Phenotypic

das klinische Erscheinungs-bild (Phänotyp)

the clinical presentation (phenotype)

und Außerdem muss der genotyp dem Phänotyp entsprechen.

and must also comply with the genotype-phenotype.

der genotyp muss dem Phänotyp entsprechen.

the genotype must match the phenotype.

Antisense-Oligomer-behandelte Stammzell-Zusammensetzung, erhältlich durch das Verfahren des: (a) Behandelns einer Stammzell-enthaltenden Zellpopulation, erhalten von einem Individuum, auf eine Weise, die wirksam die Zellpopulation für hämatopoetische Stammzellen anreichert; und (b) Kontaktierens der angereicherten Stammzellpopulation ex vivo mit einem Antisense-Morpholino-Oligomer, gekennzeichnet durch eine Hauptkette, welche im Wesentlichen ungeladen ist und gegen eine Sequenz gerichtet ist, die sich über das mRNA-Translationsstartcodon eines EVI-Zinkfingergens erstreckt; wobei die Oligomer-behandelte Stammzell-Zusammensetzung gekennzeichnet ist durch eine stärkere Differenzierung der Stammzellen in einen reiferen Phänotyp als eine Population von Schritt (b), die nicht mit dem Antisense-Oligomer behandelt wurde.

An antisense oligomer-treated stem cell composition, obtainable by the process of: (a) treating a stem cell-containing cell population obtained from a subject in a manner effective to enrich the cell population for hematopoietic stem cells; and (b) exposing the enriched stem cell population ex vivo to an antisense morpholino oligomer characterized by a backbone which is substantially uncharged and directed to a sequence spanning the mRNA translational start codon of an EVI zinc finger gene; wherein said oligomer-treated stem cell composition is characterized by a greater differentiation of said stem cells to a more mature phenotype than a population of step (b) not treated with said antisense oligomer.

Verfahren zur Herstellung von GSEs (genetischen Suppressorelementen mit den Stufen: (a) Erhalten einer gesamten cDNA-Population aus den Zellen, (b) Zufallsfragmentierung der cDNA-Population, um Zufalls-cDNA-Fragmente herzustellen, (c) Ligieren der zufälligen cDNA-Fragmente mit synthetischen Adaptern, um amplifizierbare, zufällige cDNA-Fragmente herzustellen, (d) Amplifizieren der zufälligen cDNA-Fragmente, (e) Klonen des amplifizierten Gemisches von zufälligen cDNA-Fragmenten in einen retroviralen Expressionsvektor mit einem auswählbaren Marker, um eine normalisierte Zufallsfragmenexpressionsbibliothek herzustellen, (f) Übertragen der normalisierten Zufallsfragmentexpressionsbibliothek in geeignete Zielzellen, (g) Auswählen der Zielzellen auf Anwesenheit des in dem Expressionsvektor anwesenden, auswählbaren Markers hin, um Zielzellen mit dem auswählbaren Marker zu erhalten, (h) Auswählen oder Screenen der Zielzellen mit dem auswählbaren Marker auf den auswählbaren oder screenbaren Phänotyp hin, der den Zellen durch Inaktivierung eines rezessiven Gens durch ein GSE verliehen wurde, (i) Gewinnen des GSE aus der Zielzelle, die den auswählbaren oder screenbaren Phänotyp hat.

A method for producing GSEs (genetic suppressor elements) comprising the steps of: (a) obtaining a total cDNA population from the cells; (b) randomly fragmenting the cDNA population to produce random cDNA fragments; (c) ligating the random cDNA fragments to synthetic adaptors to produce amplifiable random cDNA fragments; (d) amplifying the random cDNA fragments; (e) cloning the amplified mixture of random cDNA fragments into a retroviral expression vector having a selectable marker to produce a normalized random fragment expression library; (f) transferring the normalized random fragment expression library into appropriate target cells; (g) selecting the target cells for the presence of the selectable marker present in the expression vector to obtain target cells having the selectable marker; (h) selecting or screening the target cells having the selectable marker for the selectable or screenable phenotype conferred upon the cells by inactivation of a recessive gene by a GSE; (i) recovering the GSE from the target cell having the selectable or screenable phenotype.

Die statischen Magnetfeld-exponierten Zellen zeigten im Vergleich zu den schein-exponierten Zellen nach sieben und zehn Tagen Exposition einen differenzierteren Phänotyp, eine höhere Anzahl an differenzierten Zellen und eine signifikant höhere TRAP-Enzymaktivität. Gepulste elektromagnetische Feld-exponierte Zellen haben einen weniger differenzierten Phänotypen nach der siebentägigen Exposition im Vergleich zur schein-exponierten Kontrolle (kein Unterschied nach 10 und 14 Tagen), wohingegen die TRAP-Enzymaktivität zu keinem Beobachtungszeitpunkt statistisch signifikante Unterschiede zwischen den exponierten und den Kontroll-Zellen zeigte.

The static magnetic field-exposed cells showed a more differentiated phenotype, a higher number of differentiated cells and a significantly higher TRAP enzyme activity after 7 and 10 days of exposure with respect to a sham exposed cells. Pulsed electromagnetic field exposed cells have a less-differentiated phenotype after 7 days of exposure compared with the relative sham exposed control (no difference after 10 and 14 days), while the TRAP enzyme activity showed no statistically significant differences between exposed and control cells at any observation time.

Antivirale Aktivität entsprechend dem Genotyp und Phänotyp vor Behandlungsbeginn:

Antiviral activity according to baseline genotype and phenotype: