agars

An assay to detect UO2 complexation was developed based on the chrome azurol S (CAS) assay for siderophores (B. Schwyn and J. B. Neilands, Anal. Biochem. 160:47-56, 1987) and was used to investigate the ability of fungal metabolites to complex actinides. In this assay the discoloration of two dyed agars (one containing a CAS-Fe3 dye and the other containing a CAS-UO2 dye) caused by ligands was quantified. The assay was tested by using the siderophore desferrioxamine B (DFO), and the results showed that there was a regular, reproducible relationship between discoloration and the amount of siderophore added.

Assay zu UO2 Komplexierung detektieren wurde basierend auf der Chrom Azurol S (CAS) Assay für Siderophore (B. Schwyn und JB Neilands, Anal. Biochem. 160:47-56, 1987) entwickelt und wurde verwendet, um die Fähigkeit zu untersuchen Pilzmetaboliten , komplexe Actiniden. In diesem Assay wird die Verfärbung von zwei gefärbten Agars (eine mit einer CAS-Fe3 Farbstoff und das andere mit einer CAS-UO2 Farbstoff) durch Liganden verursacht wurde quantifiziert. Der Assay wurde unter Verwendung des Siderophor Desferrioxamin B (DFO) getestet, und die Ergebnisse zeigten, dass es eine normale, reproduzierbare Beziehung zwischen Verfärbung und der Menge an siderophoren zugegeben.

To test the relationship between the discoloration of the dyed agars and the amount of ligand added, DFO solutions (200 l; 0.1 to 1 mM) were added to the wells. To test the effect of acid on the dyed agars, DFO solutions (100 l; 0.1 to 1.0 mM), citric acid solutions (100 l; 1 to 100 mM), and hydrochloric acid (100 l; 0.01 to 1.00 M) were added to the wells. To screen the soil isolates, supernatants (200 l) from the iron-limited universal cultures were added to the wells. The dishes were left at room temperature for 1 week.

Zu den Vertiefungen zugegeben, um die Beziehung zwischen der Verfärbung der gefärbten Agars und der Menge des Liganden zugegeben, DFO-Lösungen (0,1 bis 1 mM 200 l) zu testen. Um die Wirkung der Säure auf den gefärbten Agars testen, DFO Lösungen (100 l, 0,1 bis 1,0 mM), Zitronensäure Lösungen (100 l, 1 bis 100 mM) und Salzsäure (100 l, 0,01 bis 1,00 M) zugegeben in die Vertiefungen. Um die Boden-Isolate screenen wurden die Überstände (200 l) aus den Eisen-beschränkten universellen Kulturen zu den Vertiefungen zugegeben. Die Schalen wurden bei Raumtemperatur für 1 Woche verlassen.